Briefly, cells were stained with nike air force 1 mid dames combinations of the following antibodies: CD4 V500, CD44 V450, CD3 PerCP Cy5.5, nike air max command flex CD8 Texas Red, IL 4 and IL 13 Alexa Fluor 488, IL 2 APC, TNF Alexa Fluor 700, IFN PE, IL 17 PE Cy7 and LIVE/DEAD Fixable Aqua. Flow cytometry was performed on FACS LSRII instruments using DIVA software (BD Biosciences) and data were then analyzed using Flowjo software (Tree nike free 4.0 flyknit zwart Star Inc.).Multiplex cytokine assayThe proinflammatory panel 1 (Mouse) 7 plex cytokine assay (IFN , IL 2, IL 4, IL 5, IL 6, IL 10, TNF ) or the Th1/Th2 panel (mouse) 9 plex cytokine assay (IFN , IL 1b, IL 2, nike air max dames aktiesport IL 4, IL 5, IL 10, TNF , IL 12) or the mouse IL 17 assay (all from Meso Scale Discovery) were performed according to the manufacturer's instructions. The plates were read nike roshe one all black on the Sector Imager 2400 system or 6000 system (Meso Scale Discovery) and calculation of cytokine concentrations in unknown samples was determined by 4 parameter logistic non nike air max 1 liberty london linear regression analysis of the nike air max 1 liberty london standard curve.Mycobacterial challengeSix weeks after the third immunization animals were infected with Mycobacterium tuberculosis Erdman (ATCC) by the aerosol route as described previously15.

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